Технологія проведення стерильних робіт
Зміст
Введення
Прибирання робочої зони
Особиста гігієна
Психологічна гігієна
Записи в журналі (лабораторний щоденник)
Введення
Живильне середовище для грибів, відоме як субстрат, схоже з їжею для людини: воно містить необхідний баланс вуглеводів, білків, мінералів і вітамінів. Як і наша їжа, воно привабливе для різних мікроорганізмів. Подібно до булки хліба, забутої на кухні на кілька днів, субстрат швидко стає їхньою приманкою.
Проте, на відміну від людини, гриби - це також мікроорганізми, і їм доводиться конкурувати за їжу з іншими сусідніми мікроорганізмами. Тут бактерії мають явну конкурентну перевагу, оскільки вони здатні розмножуватися в тисячі і навіть мільйони разів швидше, ніж грибний міцелій. Навіть міцелій цвілевих грибів випереджає звичайний грибний міцелій за швидкістю росту і часом колонізації. Присутність хоча б однієї спори плісняви або навіть невеликої кількості бактерій може призвести до утворення запліснявілої маси або "смердючої каші".
Крім того, в кожному кубічному сантиметрі повітря в невеликій кімнаті міститься понад 100 000 частинок. Невидимий і безшумний "дощ" зі спор плісняви, пилу і рослинних частинок безперервно осідає на кожній горизонтальній поверхні у вашому домі, незалежно від того, знаєте ви про це чи ні. Єдиний спосіб запобігти атакам цих мікроорганізмів на ваш субстрат - переконатися, що вони ніколи не потраплять туди. Існують два основні підходи до цього: повне знищення плісняви та бактерій, які вже перебувають у субстраті, і запобігання потраплянню нових мікроорганізмів до субстрату, працюючи в воістину чистому (і стерильному) лабораторному середовищі. Рекомендуємо усувати всі мікроорганізми з поживних середовищ шляхом стерилізації або автоклавування в спеціальному пристрої, де практично жодна жива істота не може вижити при високій температурі (121 °C) і тиску (15 фунтів на квадратний дюйм). Потім ми підтримуємо стерильність нашого робочого простору шляхом фільтрації повітря (за допомогою фільтра HEPA) і/або хімічної дезінфекції.
Ці дві стратегії являють собою методи стерильної або асептичної техніки культивування, і вони є ключовими компонентами, необхідними для успішного вирощування грибів. Дозвольте мені ще раз наголосити на цьому: оволодіння навичками стерильної техніки - це абсолютно основне, чим ви маєте оволодіти. Якщо ви це не усвідомлюєте, жоден із методів з вирощування грибів не приведе до успіху, навіть якщо ви дотримуєтеся інструкцій найуважнішим чином. Можливо, вам пощастить настільки, що ви отримаєте один або два гриби, але здебільшого результатом буде величезна кількість синьої, зеленої та чорної цвілі, а також неприваблива, смердюча збірна солянка з бактерій.
Багато грибоводів-початківців стикаються з невдачею вже на початковому етапі, і ті, хто досяг успіху, отримали урок про те, як і для чого використовувати стерильну техніку. Методи, описані в цій статті, допоможуть вам правильно орієнтуватися, заощаджуючи вам безліч часу, нервів і ресурсів.
(1). Звісно, існує чимало стерильних методів роботи, проте далеко не всі з них є доступними (з урахуванням матеріальних витрат) для домашнього грибовода.
Отже, наголосимо ще раз: оволодіння навичками стерильної культури справді вкрай важливе.
Прибирання робочої зони
Підготовка робочого простору починається з його ретельного прибирання. Першим кроком для вас буде створення чистої робочої зони. Ідеально, якщо у вас є можливість виділити кімнату або окремий простір спеціально для грибних проєктів, як-от запасна спальня або невикористовувана гардеробна. У разі відсутності такого простору, більша частина лабораторних операцій може бути проведена на кухні середніх розмірів, але при цьому необхідно підтримувати високий рівень чистоти. Кухня вважається одним із найбільш забруднених і біологічно активних приміщень у будинку, тому кількість цвілі в ній дуже висока. Проте використання кухні забезпечує зручний доступ до води і плити. Якщо ви плануєте виділити місце для грибів, переконайтеся, що воно розташоване близько до кухні. Адже немає сенсу стерилізувати свої матеріали, щоб потім переносити їх через увесь "негігієнічний" будинок у лабораторію.
Ваша робоча зона має містити стіл пристойних розмірів, бажано з міцною поверхнею, що легко миється. Ламінований стіл або стіл із дерева, вкритого емаллю, чудово підходить, оскільки робоче місце потрібно обов'язково протирати спиртом перед кожним використанням. Якщо у вас дерев'яний стіл, варто подумати про те, щоб покласти на нього тонку фанеру з пластиковою ламінованою поверхнею або шматок товстого вінілу. Також підлога в робочій зоні має бути такою, що легко миється (лінолеум або плитка), і її має бути легко перевіряти на чистоту. Килими є накопичувачами спор і пилу, мільйони з яких піднімаються в повітря з кожним кроком, тому краще уникати їх, якщо це можливо. Стіни мають бути бездоганно чистими (свіжий шар фарби не завадить), а всі інші поверхні в кімнаті слід ретельно протерти. Якщо це можливо, використовуйте дезінфекційний засіб (продукти на основі апельсинової олії або олії чайного дерева підійдуть, оскільки вони не тільки ефективно знищують мікроби, а й приємно пахнуть, а також екологічно безпечні). Зрозуміло, якщо ви працюєте на кухні, ви не зможете щоразу обробляти кожну поверхню перед використанням, але регулярне очищення та дезінфекція обов'язкові, якомога частіше перед кожним використанням.
Робочий простір має бути позбавлений протягів, щоб мінімізувати рух повітря навколо ваших грибних культур. Перед початком роботи вікна слід щільно закрити, повітропроводи витяжки - закрити, кондиціонер - вимкнути, а двері - закрити заздалегідь. За можливості уникайте наявності в кімнаті інших джерел забруднення. Видаліть заздалегідь горшкові рослини, акваріуми, корми для домашніх тварин і ящики для сміття. Це дасть змогу запобігти потраплянню зайвих мікроорганізмів у вашу робочу зону. Для додаткової чистоти та безпеки корисно використовувати пристрій для фільтрації повітря в лабораторії. У наш час хороші фільтри коштують менш як 100 доларів, вентилятори в них працюють безшумно і вони ефективно забезпечують безперервну фільтрацію повітря. Під час вибору пристрою зверніть увагу на рейтинг HEPA (високоефективний фільтр для вловлювання частинок), який означає, що фільтр здатний вловлювати частинки розміром 0,1 мікрона і більше з ефективністю 99,97%. Рекомендується використовувати фільтр HEPA для ретельного очищення повітря в приміщенні.
Нарешті, необхідно забезпечити чистоту повітря безпосередньо біля робочої зони. Ви можете зробити це, працюючи в рукавичковому ящику - невеликому закритому просторі, який може бути дезінфікований, позбавлений протягів. Також можна працювати перед потоком стерильного повітря з ламінарної шафи, оснащеної фільтром HEPA. Цей фільтр забезпечує постійний потік стерильного повітря в робочій зоні, запобігаючи зараженню. Ящик для рукавичок можна легко і дешево виготовити самостійно, проте він менш ефективний, оскільки в нього може потрапляти повітря з кімнати. Ламінарна шафа коштує дорожче, але окупається, оскільки забезпечує роботу в стерильних умовах, навіть на відкритому повітрі. В інтернеті можна знайти пристрої та інструкції щодо самостійного виготовлення цих предметів для лабораторії.
Особиста гігієна
Тепер, після того як ви очистили і підготували свій робочий простір як лабораторію, настав момент звернути увагу на інше важливе джерело можливої контамінації - ви самі. Ваше тіло, волосся та одяг - це своєрідні "тропічні джунглі", населені бактеріями, вірусами та грибками, які, хоча й невидимі для очей, здебільшого нешкідливі для вас і оточуючих, але можуть бути руйнівними для грибних культур. Для мінімізації цієї "неприємної компанії" необхідно дотримуватися високого рівня гігієнічності перед кожним етапом роботи або входом до лабораторії.
Це означає, що перед початком роботи ви маєте прийняти душ, висушити тіло свіжим рушником і вдягнути на себе чистий одяг безпосередньо перед тим, як приступити до справ. Цей одяг також має бути спеціально призначений тільки для роботи в лабораторії. Не менш важливим є вибір одягу. Уникайте сорочок з довгими рукавами, які можуть заважати під час роботи. Краще тримати руки оголеними до ліктя. Якщо ваше волосся довге, закріпіть його в хвіст і приберіть під шапочку. Обробіть руки та передпліччя ізопропіловим спиртом (за допомогою серветки) і завжди використовуйте одноразові хірургічні рукавички під час роботи (також обробивши зовнішню поверхню рукавичок спиртом).
Психологічна гігієна
Аналогічно до того, як ви підготували своє робоче місце і дбали про фізичний стан вашого тіла, також не забувайте про свій психологічний стан перед початком роботи. Психологічне благополуччя відіграє не менш важливу роль, ніж фізична гігієна. Адже ваш настрій і психологічний стан сильно впливають на те, як ви виконуєте свою роботу. Якщо ви допускаєте відволікання або поспішаєте, найімовірніше, ви припуститеся помилки або допустите контамінацію у своїх культурах.
Важливо рухатися в лабораторії з обережністю, розсудливістю і цілеспрямованістю. Уникайте зайвих швидких рухів і різких переміщень, оскільки вони можуть викликати небажані потоки повітря. Не поспішайте. Якщо у вас є поспіх, рекомендується сповільнитися або відкласти проєкт на більш слушний час. Те ж саме стосується сім'ї: просіть чоловіка, дружину і дітей дотримуватися обмежень доступу в лабораторію, а також обмежте доступ кішок і собак.
Не входьте в лабораторію, якщо ви хворієте, відчуваєте втому або не в настрої. Також рекомендується вимкнути мобільний телефон, щоб уникнути відволікаючих повідомлень. Якщо вам це допомагає, увімкніть музику в лабораторії, яка заспокоює і піднімає настрій, але уникайте жанрів хард-року або спід-металу. Якщо така музика допомагає вам зосереджуватися і не заважає вашій роботі, то чому б і ні.
Записи в журналі (лабораторний щоденник)
Ретельне і докладне ведення обліку (лабораторного щоденника) всіх проведених експериментів відіграє важливу роль в ефективній лабораторній роботі. У більшості етапів грибного вирощування потрібне розширення зернової культури й отримання більшого обсягу, ніж на попередньому етапі. Наприклад, з однієї чашки Петрі можна отримати десять нових чашок Петрі або банок із зерновою культурою, з однієї банки можна отримати шість пакетів із зерновою культурою і так далі. Можливість легко ідентифікувати кожен штам за допомогою системи кодування значно економить час і зусилля в довгостроковій перспективі. Це також дає змогу оцінити перебіг роботи, виявити успіхи та невдачі, а також відстежувати кожен етап виробництва від початку до кінця та за потреби виявляти джерела проблем або контамінації культур.
Необхідно присвоювати кожній банці із зерновою культурою унікальний код, який слід записувати в лабораторний блокнот. Для цієї мети підходить будь-який блокнот, хоча сторінки з розміткою або графікою можуть бути корисними для структурування даних і створення таблиць і діаграм. Якщо в електронному блокноті немає нумерації сторінок, її варто додати у верхній частині кожної сторінки.
Щоразу, коли ви розпочинаєте новий експеримент з вирощування грибів (наприклад, відтворення культури в окремому контейнері, банці чи чашці), почніть запис на новій сторінці блокнота. У верхній частині сторінки вкажіть дату й опис експериментів, що проводяться ("культивація на чашці Петрі з поживним середовищем MYA" або "інокуляція банки з житнім зерном спорами"), включно з додатковою інформацією, наприклад, застосованими технологіями або нетрадиційними методами виробництва. Створіть на сторінці три стовпці, які позначте зліва направо: вихідні культури, номер експерименту (число і місяць) та особливі нотатки.
